培養(yǎng)基是微生物試驗的基礎

　　培養(yǎng)基是微生物試驗的基礎,直接影響微生物試驗結果.適宜的培養(yǎng)基制備方法,貯藏條件和質量控制試驗是提供優(yōu)質培養(yǎng)基的保證.
　　培養(yǎng)基的制備
　　微生物實驗室使用的培養(yǎng)基可按處方配制,也可使用按處方生產的符合規(guī)定的脫水培養(yǎng)基.
　　在制備時,應選擇質量符合要求的脫水培養(yǎng)基或按單獨配方組分進行配制.（應附有處方和使用說明,配制時應按使用說明上的要求操作以確保質量符合要求,結塊或顏色發(fā)生改變的脫水培養(yǎng)基不得使用.）
　　脫水培養(yǎng)基或單獨配方組分應在適當的條件下貯藏,如低溫,干燥和避光,所用的容器應密封,尤其是盛放的容器.商品化的成品培養(yǎng)基除了應附有處方和使用說明外,還應注明有效期,貯藏條件,適用性檢査試驗的質控菌和用途.為保證質量的穩(wěn)定可靠,各脫水培養(yǎng)基或各配方組分應準確稱量,并要求有一定的精確度.
　　配制常用的溶劑是純化水.應記錄各稱量物的重量和水的使用量.
　　配制所用容器不得影響培養(yǎng)基質量,一般為玻璃容器.配制所用的容器和配套器具應潔凈,可用純化水沖洗以消除清潔劑和外來物質的殘留.對熱敏感的培養(yǎng)基如糖發(fā)酵培養(yǎng)基其分裝容器一般應預先進行滅菌,保證無菌性.
　　脫水培養(yǎng)基應*溶解于水中,再行分裝與滅菌.配制時若需要加熱助溶,應注意不要過度加熱,避免培養(yǎng)基顏色變深.如需要添加其他組分時,加人后應充分混勻.培養(yǎng)基滅菌應按照生產商提供或使用者驗證的參數進行.商品化的成品培養(yǎng)基必須附有所用滅菌方法的資料.
　　滅菌一般采用濕熱滅菌技術,特殊培養(yǎng)基可采用薄膜過濾除菌.
　　培養(yǎng)基若采用不適當的加熱和滅菌條件,有可能引起顏色變化,透明度降低,瓊脂凝固力或pH值的改變.因此,培養(yǎng)基應采用驗證的滅菌程序滅菌,滅菌方法和條件,應通過無菌性試驗和促生長試驗進行驗證.此外,對髙壓滅菌器的蒸汽循環(huán)系統也要加以驗證,以保證在一定裝載方式下的正常熱分布.溫度緩慢上升的高壓滅菌器可能導致培養(yǎng)基的過熱,過度滅菌可能會破壞絕大多數的細菌和真菌培養(yǎng)基促生長的質量.滅菌器中培養(yǎng)基的容積和裝載方式也將影響加熱的速度.因此,應根據滅菌培養(yǎng)基的特性,進行全面的滅菌程序驗證.應確定每批培養(yǎng)基滅菌后的pH值（冷卻至室溫25℃測定）.如果處方中未列出pH值的范圍,除非經驗證表明培養(yǎng)基的PH值允許的變化范圍很寬,否則,pH值的范圍不能超過規(guī)定值±0.2.
　　制成平板或分裝于試管的培養(yǎng)基應進行下列檢查:容器和蓋子不得破裂,裝量應相同,盡量避免形成氣泡,固體培養(yǎng)基表面不得產生裂縫或漣漪,在冷藏溫度下不得形成結晶,不得污染微生物等.應檢查和記錄批數量,有效期及無菌檢查.