熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)

熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)SYBR Green特性：

（1）只有和雙鏈DNA結(jié)合后才發(fā)熒光。

（2）變性時(shí)，DNA雙鏈分開，無熒光。

（3）在延伸結(jié)束階段采集熒光信號(hào)。

（4）SYBR Green也能和非特異性的雙鏈DNA結(jié)合發(fā)光，所以必須在反應(yīng)結(jié)束時(shí)做熔解曲線分析。 

熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)PCR技術(shù)于1996年由美國Applied Biosystems公司推出，由于該技術(shù)不僅實(shí)現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規(guī)PCR相比，它具有特異性更強(qiáng)、有效解決PCR污染問題、自動(dòng)化程度高等特點(diǎn)，目前已得到廣泛應(yīng)用。 

TaqMan探針的特性：

（1）5′端標(biāo)記有報(bào)告基團(tuán)（Reporter, R），如FAM、VIC等 

（2）3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán) （Quencher, Q）

（3）探針完整，R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收 ，無熒光， R與Q分開，發(fā)熒光（4）Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性，可水解探針。

定量的標(biāo)準(zhǔn)樣品：

（1）含有和待測(cè)樣品相同擴(kuò)增片段的克隆質(zhì)粒

（2）含有和待測(cè)樣品相同擴(kuò)增片段的cDNA

（3）PCR的產(chǎn)物，可分別做系列稀釋。